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    酵母质粒转化试剂盒

    • 型号M482

    产品介绍: 新型酵母快速转化试剂盒适用于液体培养的酵母转化或者对生长在平板上的酵母直接进行转化。该产品操作方法简便,转化快速,酵母的转化效率高。 我们采用的是 PEG/ LiAc 法转化酵母。 PEG 是一种高分子聚合物,只有分子量达到 3000 左右的 PEG 才会发挥最大的转化促进作用。本产品使用的 PEG 分子量为 3350 ,实验结果表明促转化效果可以达 到 103~105 cfu/μg 。PEG 在酵母转化中起到在高浓度醋酸锂环境中保护细胞膜, 减少醋酸锂对细胞膜结构的过度损伤,同时促进质粒与细胞膜接触更紧密。PEG 的浓度是务必适宜,这一点很重要。 LiAc 可使酵母细胞产生一种短暂的感受性状态 , 此时它们能够摄取外源性 DNA 。 鲑鱼精 DNA 为短的线形单链 DNA ,在转化实验中主要是保护质粒免于被 DNA 酶降解;另外还可能在酵母细胞摄取外源性环形质粒 DNA 中发挥协助作用。 在每次使用前务必进行热变性,使可能结合的双链 DNA 打开,保证鲑鱼精 DNA 在转化实验体系中以单链形式存在。

    1. 详细信息

    产品介绍:
    新型酵母快速转化试剂盒适用于液体培养的酵母转化或者对生长在平板上的酵母直接进行转化。该产品操作方法简便,转化快速,酵母的转化效率高。
    我们采用的是 PEG/ LiAc 法转化酵母。 PEG 是一种高分子聚合物,只有分子量达到 3000 左右的 PEG 才会发挥最大的转化促进作用。本产品使用的 PEG 分子量为 3350 ,实验结果表明促转化效果可以达 到 103~105 cfu/μg 。PEG 在酵母转化中起到在高浓度醋酸锂环境中保护细胞膜, 减少醋酸锂对细胞膜结构的过度损伤,同时促进质粒与细胞膜接触更紧密。PEG 的浓度是务必适宜,这一点很重要。 LiAc 可使酵母细胞产生一种短暂的感受性状态 , 此时它们能够摄取外源性 DNA 。 鲑鱼精 DNA 为短的线形单链 DNA ,在转化实验中主要是保护质粒免于被 DNA 酶降解;另外还可能在酵母细胞摄取外源性环形质粒 DNA 中发挥协助作用。 在每次使用前务必进行热变性,使可能结合的双链 DNA 打开,保证鲑鱼精 DNA 在转化实验体系中以单链形式存在。

    注意事项



    1. 在做酵母筛选培养实验时,我们建议SD+补充氨基酸混合物(做平板时需加Agar)同时灭菌,虽然SD中的葡萄糖在灭菌时会有炭化变色现象,基本不影响实验效果。
    2. 若实验要求不能出现糖的炭化现象,也可选择SC+补充氨基酸混合物,在灭菌后加入过滤除菌的葡萄糖
    3.培养基灭菌前务必调到相应的pH值

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